يوما بعد يوم، تتقدم تكنولوجيا المعرفة المختلفة. أحد هذه العلوم هو علم الأحياء. والتي شهدت الكثير من التطور والتقدم في الآونة الأخيرة. في هذا العلم يعد البحث والدراسة حول الخلايا البيولوجية أمرًا مهمًا للغاية. اختبار MTT هو في الواقع اختبار يقوم بفحص وتحليل بقاء الخلايا أو موتها أو تكاثرها في ظل ظروف مختلفة. سيقوم فريق أثل طب بالتحقيق في هذا الاختبار المهم والعملي. ابقى معنا.

ملخص لاختبار MTT ؟

يرمز اختبار MTT إلى MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide). بعبارات بسيطة، يعد اختبار MTT طريقة بسيطة للتحقق من بقاء الخلية تحت استخدام، على سبيل المثال، دواء أو مادة، والهدف هو تحديد تأثير التحقق من سمية المركبات أو الأدوية أو المكملات الغذائية الأخرى على الخلية.

تعتمد هذه الطريقة على قياس الألوان. وبهذه الطريقة، يتم فحص بلورات التترازوليوم الصفراء. ويتم التعبير عن تغيراته بواسطة إنزيم هيدروجيناز السكسينات نتيجة الاختبار.

إلى الأمام إلى اختبار MTT؟

في البداية، ينبغي القول أن هذه التجربة لها ثلاث مراحل: زراعة الخلايا (البذر)، والعلاج (المعالجة)، وأخيرا تحليل MTT.

ومن الجدير بالذكر أن كل خطوة من هذه الخطوات تستغرق يومًا واحدًا.

والنقطة الجديرة بالذكر هي أن هذا الاختبار يعد من أكثر الاختبارات البيولوجية والتقنية الحيوية موثوقية. ومن أهم أسباب موثوقية هذه الطريقة مقارنة بالاختبارات الأخرى هو الدقة العالية لهذا الاختبار في تمييز الخلايا الحية من الخلايا الميتة.

في البداية، يتم استخدام مادة التترازوليوم، وهي المادة الأساسية والأهم في هذا الاختبار، في شكل مسحوق مع مادة PBS. ومن خلال الجمع بين هاتين المادتين يتم الحصول على محلول شديد الحساسية للضوء وله لون أصفر. يمتصه غشاء الخلية بشحنته الموجبة. بعد هذه الخطوات، يدخل هذا المحلول الأصفر إلى الخلايا بمساعدة الالتقام الخلوي ويذهب إلى الميتوكوندريا.

ويمكن تفعيل هذه المادة في الميتوكوندريا عن طريق إنزيم هيدروجيناز السكسينات الموجود في الخلايا التنفسية للخلية، حيث تتحول إلى رواسب أرجوانية. في الواقع، هذه المشكلة تعني أنه إذا كانت الخلايا الموجودة في الجهاز حية، فإنها تظهر ويمكن التعرف عليها بسبب إنزيم هيدروجيناز السكسينات.

للكشف عن لون المحلول الناتج، نستخدم جهازًا يسمى مقياس الطيف الضوئي. هذا الجهاز قادر على تحديد الكثافة الضوئية للخلايا الحية عند طول موجة 579 نانومتر مع طول موجة أساسي 630 نانومتر.

لإجراء اختبار MTT، بغض النظر عن الجهاز الرئيسي، نحتاج إلى بعض المعدات. هناك حاجة إلى الأوتوكلاف لتعقيم الحاويات الزجاجية. هناك حاجة إلى حمام مائي لتسخين وسط الاستنبات وفتح العينة المجمدة. نستخدم أجهزة الطرد المركزي لفصل الخلايا. ونستخدم أيضًا المجهر الضوئي المقلوب لرؤية الخلايا. أيضًا، في بيئة المختبر، نستخدم غطاء مختبر من الدرجة الثانية لمنع انتشار الروائح أو الغازات السامة.

ما هو جهاز اليسا ريدر ؟

Elisa Reader هو جهاز يقرأ نتائج اختبار MTT. هذا الجهاز قادر على تحديد الأجسام المضادة في النظام مباشرة.

نقاط مهمة في اختبار MTT

1. ومن الأفضل إجراء الاختبار 3 مرات لكل خلية لتقليل نسبة الخطأ.
2. يجب أن يكون عدد الخلايا المسموح بها في البئر بين 103 و 105 خلايا.
3. يجب ألا تكون كمية الخلايا الموجودة في البئر أكثر أو أقل من المبلغ المذكور. ويجب أن تحسب بدقة.
4. يجب أن نحصل على زمن تأثير كل دواء بشكل دقيق من خلال المقالات أو الأبحاث. لأنه مهم وحيوي للغاية لإجراء الاختبار.
5. إن الكثير من الدقة والتركيز هو أهم شيء لإجراء هذا الاختبار بأكبر قدر ممكن من الدقة. والذي يجب أن يتم في بيئة مناسبة.